CTC检查是什么检查
CTC检查是什么检查
1、CTC检查的原理
CTC是自发或因诊疗操作从实体瘤病灶脱落进入外周血循环的瘤变细胞。原发瘤变生长到一定阶段,会侵袭周围血管,肿瘤细胞会首先通过整联蛋白附着在血管基底膜处生长。当变化细胞数量逐渐增多,其分泌的基质金属蛋白酶也逐渐增加,通过逐步消化掉 IV 型胶原蛋白,突破基底膜屏障,进入血液,即被称为CTC。CTC能逃避机体免疫,从瘤变病灶脱离后进入血液系统,或被毛细血管截留,或在血液循环中被清除,少数CTC将穿过血管,在其他组织上形成新的转移灶,从而导致细胞扩散。
2、CTC检测解析
CTC检查方法主要由两大技术部分组成:负责捕获血液中CTC的CTC富集技术;负责进行CTC鉴定和识别的CTC检测技术。
(1)CTC富集技术
人体循环系统中CTC的含量极低,变异转移患者每毫升全血中仅有 1-10 个CTCs,因此要实现CTCs 的检测,对其进行分选富集是一个必不可少的步骤。CTC的富集方法可以分为免疫亲和富集法和物理特性富集法。
(2)CTC检测技术
利用CTC富集技术得到CTC后,需要对CTC进行进一步检测,以进行判别。常用的CTC检测技术有 RT-PCT、免疫荧光(IF)、荧光原位杂交(FISH)、二代测序(NGS)等。
3、CTC检查技术趋势
(1)微流控芯片技术有望得到更广泛应用
微流控芯片技术在细胞分选方面具有一定的优势,其特点包括芯片体积小、速度快、通量高、操作简便、样品和试剂消耗低、易在芯片上集成多用途功能部件等。经过十余年发展, 该技术已在CTC检测分选中得到广泛应用,未来有望成为CTC富集和检测工具之一。微流控芯片技术也面临一些技术方面和临床方面的挑战:①芯片通道空间小,实验过程中管道易被堵塞;②部分特殊的芯片造价昂贵,不便于推广应用;③在进行细胞分选时,有些方法难以确保较高的细胞活性;④缺乏统一的CTC表面标志物。如何解决微流控芯片技术在进行细胞分选时所遇到的问题,充分发挥其优势,将是CTC检测技术下一阶段研究的关键。
(2)开发纳米技术和适配体在微流控芯片中的应用
CTC检测的灵敏度和可靠性非常重要,7.5ml 血液中有 1-5 个CTC在临床上都是有意义的,假阴性和假阳性都可能对样品分析、临床诊断产生重要影响。随着纳米技术不断发展,功能化纳米材料修饰的微流控芯片将广泛应用于CTC的富集和检测。抗体连接的功能
性纳米粒子能够为CTC与抗体的结合提供更大的接触表面积,因此纳米技术也成为细胞分选中备受瞩目的一项新技术。适配体可提供特异性CTC靶点,因此微流控芯片的应用或将向基于新的CTC捕获探针(如核子适配体探针等)方面发展,寻找特异性强的适配体探针, 以提高CTC检测的可靠性。
(3)基于多种捕获方法设计微流控芯片
亲和性富集法特异性高,能有效分选形状、大小相似的不同种类细胞。但是阳性富集法约有 60%使用 EpCAM,会丢失不表达或低表达 EpCAM 的CTC,而阴性富集法只是去除了白细胞,获得的CTC纯度不高。物理特性富集法不依赖细胞表面标志物的表达,捕获的细胞数量多,能够克服CTC在蛋白表达上的异质性,但是无法克服CTC检查在物理特性的异质性。因此,采用多种捕获方法相结合,充分利用各自的优点设计CTC检查捕获微流控芯片是将来的发展趋势。如第三代芯片CTC-iChip,其利用确定性侧向位移、惯性聚焦和免疫磁珠富集CTC。
CTC检查是什么检查
ctc
1、CTC检查的原理
CTC是自发或因诊疗操作从实体瘤病灶脱落进入外周血循环的瘤变细胞。原发瘤变生长到一定阶段,会侵袭周围血管,肿瘤细胞会首先通过整联蛋白附着在血管基底膜处生长。当变化细胞数量逐渐增多,其分泌的基质金属蛋白酶也逐渐增加,通过逐步消化掉 IV 型胶原蛋白,突破基底膜屏障,进入血液,即被称为CTC。CTC能逃避机体免疫,从瘤变病灶脱离后进入血液系统,或被毛细血管截留,或在血液循环中被清除,少数CTC将穿过血管,在其他组织上形成新的转移灶,从而导致细胞扩散。
2、CTC检测解析
CTC检查方法主要由两大技术部分组成:负责捕获血液中CTC的CTC富集技术;负责进行CTC鉴定和识别的CTC检测技术。
(1)CTC富集技术
人体循环系统中CTC的含量极低,变异转移患者每毫升全血中仅有 1-10 个CTCs,因此要实现CTCs 的检测,对其进行分选富集是一个必不可少的步骤。CTC的富集方法可以分为免疫亲和富集法和物理特性富集法。
(2)CTC检测技术
利用CTC富集技术得到CTC后,需要对CTC进行进一步检测,以进行判别。常用的CTC检测技术有 RT-PCT、免疫荧光(IF)、荧光原位杂交(FISH)、二代测序(NGS)等。
3、CTC检查技术趋势
(1)微流控芯片技术有望得到更广泛应用
微流控芯片技术在细胞分选方面具有一定的优势,其特点包括芯片体积小、速度快、通量高、操作简便、样品和试剂消耗低、易在芯片上集成多用途功能部件等。经过十余年发展, 该技术已在CTC检测分选中得到广泛应用,未来有望成为CTC富集和检测工具之一。微流控芯片技术也面临一些技术方面和临床方面的挑战:①芯片通道空间小,实验过程中管道易被堵塞;②部分特殊的芯片造价昂贵,不便于推广应用;③在进行细胞分选时,有些方法难以确保较高的细胞活性;④缺乏统一的CTC表面标志物。如何解决微流控芯片技术在进行细胞分选时所遇到的问题,充分发挥其优势,将是CTC检测技术下一阶段研究的关键。
(2)开发纳米技术和适配体在微流控芯片中的应用
CTC检测的灵敏度和可靠性非常重要,7.5ml 血液中有 1-5 个CTC在临床上都是有意义的,假阴性和假阳性都可能对样品分析、临床诊断产生重要影响。随着纳米技术不断发展,功能化纳米材料修饰的微流控芯片将广泛应用于CTC的富集和检测。抗体连接的功能
性纳米粒子能够为CTC与抗体的结合提供更大的接触表面积,因此纳米技术也成为细胞分选中备受瞩目的一项新技术。适配体可提供特异性CTC靶点,因此微流控芯片的应用或将向基于新的CTC捕获探针(如核子适配体探针等)方面发展,寻找特异性强的适配体探针, 以提高CTC检测的可靠性。
(3)基于多种捕获方法设计微流控芯片
亲和性富集法特异性高,能有效分选形状、大小相似的不同种类细胞。但是阳性富集法约有 60%使用 EpCAM,会丢失不表达或低表达 EpCAM 的CTC,而阴性富集法只是去除了白细胞,获得的CTC纯度不高。物理特性富集法不依赖细胞表面标志物的表达,捕获的细胞数量多,能够克服CTC在蛋白表达上的异质性,但是无法克服CTC检查在物理特性的异质性。因此,采用多种捕获方法相结合,充分利用各自的优点设计CTC检查捕获微流控芯片是将来的发展趋势。如第三代芯片CTC-iChip,其利用确定性侧向位移、惯性聚焦和免疫磁珠富集CTC。
CTC检查是什么检查
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